ЭФФЕКТ СЫВОРОТОЧНЫХ БЕЛКОВ
Поскольку между различными стероидами, между тироксином и трийодтиронином и некоторыми их мета-болитами и между различными формами витамина D отмечается выраженная структурная гомология, не всегда возможно получить антисыворотку, достаточно специфическую, чтобы без предварительного применения методов экстракции и разделения избира-тельно определять эти гормоны и их метаболиты.
Некоторые гормоны циркулируют в крови, будучи связанными со специфическими белками-переносчиками или более рых-лой связью с альбумином. Для того чтобы избежать загрязнения радиоиммунологиче-ской системы связывающими белками сыворотки, необходимо вначале экстрагировать гормон соответствующим растворителем. Начальную экстракцию следует проводить и при малой специфичности антител к гормону. В некоторых случаях может оказаться достаточной дифференциальная экстракция, но в других необходимо произвести хро-матографическое разделение гормонов. К наиболее распространенным средствам раз-деления структурно близких стероидов относятся тонкослойная хроматография и хро-матография на колонках сефадекса LH-20. Поскольку крупные полипептидные гормоны циркулируют в крови, не будучи связанными с белками-переносчиками, начальный этап экстракции в этом случае не нужен, и аликвоту сыворотки можно прямо поме-щать в пробирку для анализа. Однако содержащиеся в сыворотке протеазы могут обу-словить занижение концентрации некоторых полипептидных гормонов. Если разрушение гормона существенно изменяет его структуру, он может и не реагировать с антите-лами. В результате появляется необходимость добавления в пробу ингибиторов фер-ментов, чтобы противодействовать эффекту протеаз. К ингибиторам протеаз, добав-ляемых в сосуды с пробами на АКТГ, глюкагон и другие гормоны, которые могут под-вергаться быстрой протеолитической деградации, относятся трасилол и бензами-дин.В отношении некоторых полипептидных гормонов отмечаются неспецифиче-ские эффекты сывороточных белков. Эти неспецифические белковые эффекты можно ни-велировать, добавляя пустую сыворотку в пробирки для исследования, не содержащие сыворотки, с тем, чтобы все пробирки содержали сравнимые концентрации мешающих определению сывороточных белков. Каждую антисыворотку можно эмпирически прове-рять на неспецифический эффект белка в отношении реакции антиген—антитело.
Еще по теме ЭФФЕКТ СЫВОРОТОЧНЫХ БЕЛКОВ:
- Роль фосфорилирования в эффектах цАМФ: протеинкиназы
- ЭФФЕКТ СЫВОРОТОЧНЫХ БЕЛКОВ
- 9.17.4. Сывороточные иммунные препараты
- СЫВОРОТОЧНАЯ БОЛЕЗНЬ
- Глава 1 ХИМИЯ БЕЛКОВ
- Глава 14 БИОСИНТЕЗ БЕЛКА
- ПРОДУКТЫ КАТАБОЛИТНОГО РАСПАДА КЛЕТОЧНЫХ РЕЦЕПТОРОВ (Р-БЕЛКИ)У БОЛЬНЫХ С НМК
- ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА ВЕЛИЧИНУ ЭФФЕКТА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
- АНТИТЕЛА - ЭФФЕКТОРНЫЕ МОЛЕКУЛЫ ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА
- 13.10. СЫВОРОТОЧНАЯ БОЛЕЗНЬ
- Переносимость и побочные эффекты
- Эффекторные механизмы иммунного ответа.
- Белки острой фазы воспаления. Пентраксины
- 6.3.3.5. СЫВОРОТОЧНЫЙ АЛЬБУМИН
- ИНФУЗИОННО-ТРАНСФУЗИОННАЯ ТЕРАПИЯ БЕЛКОВОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ
- ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ ТИРЕОИДНЫХ ГОРМОНОВ И МЕХАНИЗМ ИХ ДЕЙСТВИЯ
- ВИСЦЕРАЛЬНЫЕ БЕЛКИ _