Вирусы бактерий (бактериофаги)
Выделение и выявление. Выделить бактериофаг нетрудно. Нужно лишь взять материал из естественного местообитания соответствующего вида бактерий и вместе с бактериями залить питательной -Средой.
Если такую накопительную культуру инкубировать в условиях, благоприятных для данных бактерий, то вскоре размножатся и содержавшиеся в пробе фаги. Вирус размножается всегда только в растущих клетках. Можно путем центрифугирования или фильтрации удалить оставшиеся бактерии, а затем в надосадочной жидкости-«лизате»-определить количество фагов. Если засеять плотную питательную среду бактериальной взвесью, не содержащей фагов, то на ее поверхности образуется сплошной газон из бактерий. Если же теперь высеять суспензию, содержащую небольшое число фагов, в газоне появятся свободные от бактерий участки (стерильные пятна, или бляшки). В том месте, куда попал фаг и где он поразил бактерию, лизируется все большее число бактериальных клеток; через некоторое время инфицированная фагом область становится заметной уже невооруженным глазом как пятно, не содержащее бактерий, на фоне бактериального газона (рис. 4.1, В). Ис-пользуя подходящие методы, можно быстро размножать бактериофаги на бактериальных газонах на твердых средах или в суспензиях бактерий. Затем отделяют бактериальные клетки центрифугированием, убивают оставшиеся бактерии хлороформом и получают таким образом фаговый лизат, содержащий обычно от 1010 до 1013 фагов в 1 мл.Морфология бактериофагов. Строение бактериофагов в основном изучали на примере фагов серии Т Escherichia coli.Колифаг Т2 состоит из полиэдрической головки длиной 100 нм и отростка, или «хвоста», примерно такой же длины. Поэтому говорят о «составных» вирусах (табл. 4.1). Головка состоит из капсомеров и содержит внутри ДНК. Количество белка и ДНК примерно одинаково. Отросток фага Т2 имеет сложное строение. В нем можно различить не менее трех частей: полый стержень, окружающий его сократимый чехол и находящуюся на дистальном конце стержня базальную пластинку с шипами и нитями (от последних зависит специфическая адсорбция на клетке-хозяине).
На электронных микрофотографиях, полученных при негативном контрастировании, можно видеть фаговые частицы в двух состояниях: у одних частиц головка очень резко выделяется на электроноплотном фоне и чехол отростка растянут, у других головка мало отличается от фона по плотности и чехол находится в сокращенном состоянии. Это схематически изображено на рис. 4.7. Первое состояние (А) характерно для активного фага, в головке которого заключена ДНК, второе (Б)-для фага, который инъецировал свою ДНК в бактериальную клетку.Многие бактериофаги имеют более простое строение. В зависимости от формы зрелых фаговых частиц различают ряд типов, которые представлены на рис. 4.8 и 4.9. Большинство фагов содержит двухцепочечную ДНК. В последние годы, однако, было обнаружено несколько фа-
Рис. 4.7. Модель фага Т2. А. Фаг с вытянутым чехлом до адсорбции. Б. Фаг с сократившимся чехлом после адсорбции и инъекции. 1 -поперечный разрез вытянутого отростка: видны 6 белковых субъединиц чехла в одной плоскости; 2-поперечный разрез сократившегося чехла: видны 12 белковых субъединиц чехла в одной плоскости; 3-базальная пластинка готового к адсорбции фага со свободными нитями.
гов с одноцепочечной ДНК и несколько с одноцепочечной РНК. Содержащие РНК фаги fr (рис. 4.9, Д), R17, QP и другие обладают наименьшими из известных геномов: в них 3500-4500 нуклеотидов.
Еще по теме Вирусы бактерий (бактериофаги):
- 2.5. Морфология вирусов, особенности классификации
- 3.7. Бактериофаги
- Тема 7. ОСОБЕННОСТИ СТРОЕНИЯ БАКТЕРИОФАГОВ.ПРОЦЕСС БАКТЕРИОФАГИИ. ПРАКТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕБАКТЕРИОФАГОВ
- § 5. Бактериофаги
- Вирусы: распространение и структура
- Вирусы бактерий (бактериофаги)
- БАКТЕРИОФАГИЯ
- Б. Применение традиционных генетических методовдля изучения вируса гриппа
- Экспрессия генов вируса гриппа в Е. coli
- Классификация вирусов, содержащих двунитевую РНК
- ОТКРЫТИЕ ВИРУСОВ
- Глава 6. РЕПРОДУКЦИЯ ВИРУСОВ
- Глава 7. ГЕНЕТИКА ВИРУСОВ
- Основы генетики вирусов животных
- Молекулярная биология трансформации клеток опухолеродными ДНК-содержащими вирусами
- ОСОБЕННОСТИ СИСТЕМАТИКИ БАКТЕРИЙ
- ВИРУСЫ БАКТЕРИИ
- МЕТОДЫ ОБНАРУЖЕНИЯ ВИРУСОВ