Исследование содержания антител к коллагену у больных с ПЛБС

Иммунологические методы исследования

В данной работе проводилось определение следующих иммунологических показателей:

• концентрации циркулирующих иммунных комплексов методом преципитации с полиэтиленгликолем 6000 по Haskova в модификации Б.А.

• иммуноглобулинов классов A, M, G методом радиальной иммунодиффузии в геле по Манчини ревматоидного фактора методом латекс-агглютинации;

• антинуклеарного фактора по Кунсу методом непрямой иммунофлюоресценции с использованием в качестве субстрата криостатных срезов печени белой крысы (Давыдов А. А., 1993).

Выделение специфических антигенов

Количество коллагена в препаратах опреде­ляли по оксипролину, являющемуся маркером коллагеновых белков в тканях. Расчет содержания оксипролина проводили по методике П.Н. Замораевой (1977).

Иммуноферментный метод

определения специфических антител

Для определения антител к коллагену в сы­воротке крови больных использовался иммуноферментный анализ (ИФА), который основан на использовании специ­фических иммуноглобулинов, меченных ферментом. При связывании антигена с антителом данный фермент катали­зирует разложение субстрата с образованием цветных про­дуктов реакции. Интенсивность окраски субстрата регист­рируется спектрофотометрически, полученные значения выражаются в относительных единицах оптической плот­ности (е. о. п.).

Содержание антител к коллагену I, II и III типов у доноров

Мы оценивали титр антител к коллагену I, II и III типов у здоровых лиц, что было необходимо для создания представления о нормальных величинах изучаемых парамет­ров, характерных в среднем для здоровых людей. Контроль­ную группу составили 30 здоровых людей, являвшихся доно­рами станции переливания крови городской клинической больницы скорой медицинской помощи (ГКБСМП), без указа­ния на заболевания суставов в течение всей жизни и прошедших традиционное медицинское обследование перед сдачей крови.

Установив среднюю концентрацию антител в донорских сыворотках с использованием ИФА 0,026±0,0031 для I типа кол­лагена, 0,0303±0,0028 - для II типа коллагена, 0,0228±0,0033 - для III типа коллагена, вычислили нормальные показатели оп­тической плотности для каждого типа коллагена (М ± 2о). При анализе полученных результатов достоверных отличий в со­держании антител к коллагенам I, II и III типов у доноров в за­висимости от возраста и пола не выявлено (р > 0,1).

Содержание антител к коллагену

I, II и III типов у больных плечелопаточным

болевым синдромом

Под наблюдением находилось 57 больных ПЛБС с различной формой и длительностью заболевания, у ко­торых повышенный уровень антител к какому-либо из трех ис­следуемых нами типов коллагена встречался значительно ча­ще, чем у представителей контрольной группы.

Выявлена корреляция различной силы между уровнем кол­лагенов исследуемых типов, с одной стороны, и содержанием в крови IgG - с другой: для коллагена I типа коэффициент кор­реляции r₁ = 0,58; для коллагена II типа - r₂ = 0,45 и для колла­гена III типа - r3 = 0,71 (р < 0,05). Не наблюдалось достоверной корреляции между содержанием антител к коллагенам и дру­гими иммунологическими показателями (IgA, IgM, АНФ, РФ).

В процессе исследований было выявлено достоверное по­вышение количества антител к коллагенам I и III типов в сы­воротке крови больных ПЛБС по сравнению со здоровыми людьми. Что касается антител к коллагену II типа, то нами бы­ла установлена тенденция к увеличению содержания данных антител по сравнению с контрольной группой, но достоверных различий не наблюдалось.

Плечелопаточный болевой синдром проявляется разнооб­разной клинической картиной, связанной с различными деге­неративными изменениями паракапсулярных тканей плечевого сустава. Поэтому в своей работе мы сопоставили показатели содержания антител к коллагену I, II и III типов в крови боль­ных ПЛБС в зависимости от его клинической формы.

Уровень антител к коллагену I, II и III типов у больных ПЛБС в зависимости от формы заболевания

Больные, которые находились под нашим наблюдением и которым проводилось определение антител к коллагену I, II и III типов, по клиническим проявлениям пле­челопаточного периартрита были разделены на три группы: 1) больные с простой формой ПЛБС; 2) больные с осложнен­ной формой ПЛБС; 3) больные с сложной формой.

Таблица 1

Содержание антител к коллагену I, II и III типов у больных с ПЛБС в зависимости от формы заболевания

Примечание: * - р > 0,05; # - р < 0,05.

Из таблицы видно, что содержание антител ко всем типам коллагена возрастает в группе больных со сложной формой ПЛБС по сравнению с простой и осложненной формами. Уро­вень антител к коллагенам трех исследуемых типов в группе больных с сложной формой незначительно превышал уровень антител у больных с осложненной формой, но был гораздо выше, чем у доноров (р < 0,001). В группе больных со сложной формой содержание антител к коллагенам I и III типа досто­верно превышало содержание антител к коллагенам соответст­вующих типов у больных с простой формой. Количество анти­тел к коллагену II типа хотя и имело тенденцию к нарастанию по мере развития в периартикулярных тканях дегенеративных изменений, но не носило статистически достоверного выраже­ния (р > 0,05).

Таким образом, для травматических повреждений ВМП при сложной форме ПЛБС характерно более высокое содержа­ние антител к коллагену III типа, чем для форм заболевания с простой и осложненной формой ПЛБС, при относительно стабильном содержании антител к коллагенам I и II типа. Дан­ное обстоятельство представляет существенный интерес для обсуждения и может быть связано с преобладанием различных механизмов синтеза и разрушения определенных типов колла­гена при ПЛБС. Выявленная нами достоверная зависимость между количеством антител и формой ПЛБС позволяет ис­пользовать изучаемые показатели как один из критериев для диагностики активности патологического процесса и объекти­визации контроля эффективности проводимой терапии.